简析国产液相色谱柱的硅胶键合相技术改进 国产液相色谱柱由接头、螺帽、柱管、填料、垫圈及过滤片等组成,其中填料为色谱柱的核心部分,科研工作者在填料上发挥奇思妙想,开发出市面上种类繁多的色谱柱,每种色谱柱又有其独特的选择性及应用。
国产液相色谱柱常用填料基质为硅胶,硅胶作为基质有如下优点:
无毒无味,化学性质稳定;
具有高机械强度和高的比表面积;
可利用表面健合反应来广泛满足正相、反相、离子交换和体积排阻色谱的需求。
国产液相色谱柱的硅胶键合相技术改进:
1.空间位阻
普通的色谱柱在ph<2时不稳定,发生水解,导致键合相流失。当我们用异丙基、二异丁基来取代甲基的话,就在键合相上形成一个保护层,这样不仅能抗水解能力(ph1-8),还能防止分离化合物与硅羟基之间的作用,改善峰型。
2.极性嵌入
在碳链上键合了极性基团,流动相在该基团处形成了水屏蔽层媒介,水层间接屏蔽了带负电的硅羟基与目标分离物接触可能性,减少与酸、强碱性化合物的吸附,减少了拖尾现象的产生,大大地改善了色谱峰型对称性。极性嵌入的另外一个优势是碳链键合极性了基团,表现出对极性物质有更强的选择。另外,极性嵌入可降低脱水(疏水塌陷)危险,即使在含水量高的流动相条件下,样品也同样有稳定保留和z佳峰形。
3.双层表面修饰
在硅胶新增加表面层硅羟基活性更低的新硅羟基ph5.2(普通硅羟基ph约为3.5),低表面硅羟基活性,抑制二次保留。
4.双齿键合
键合相的两个硅原子之间以si-o-或-ch2-ch2-等基团相连,每个硅原子含有一个长链硅烷基官能团。有效防止了超纯硅胶载体在高ph时的溶解,使其在高ph流动相中保持了z佳的稳定性,耐受ph达11.5,特别适用于分离游离的强碱性化合物。
5.杂化技术
普通硅胶在ph>8的条件下很容易被水解,且仅需要4根si-oh键被水解断裂后即有1个单元的氢氧化硅释放,导致柱效下降;而杂化硅胶需要水解6根si-oh才可将含有亚乙基桥的硅胶单元溶出,且断裂的si-o-si有可能重新连接。所以杂化颗粒技术硅胶有较宽的ph及温度耐受性。如c18柱ph耐受范围1-12,低ph条件下温度上限80℃,高ph条件下温度上限60℃。
上海通微分析技术有限公司